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時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù),開啟iPOCT智能檢測(cè)新時(shí)代!

2017-06-02

         每年一度的產(chǎn)品大爆炸時(shí)刻,今年落在青島了。不負(fù)所望,這屆檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)暨輸血儀器試劑博覽會(huì)上,單是POCT類廠商就達(dá)到了前所未有的規(guī)模,瑞輝生物更是躋身“中國(guó)最具工匠精神的IVD企業(yè)”的前十名。

 

        科技發(fā)展日新月異,很多標(biāo)志物的檢測(cè)靈敏度需要達(dá)到pg/ml級(jí)別,以膠體金層析為基礎(chǔ)的第一代POCT產(chǎn)品,通過加大樣本用量、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間等方式仍無法滿足靈敏度的要求,現(xiàn)已逐漸退出歷史舞臺(tái)。取而代之是普通熒光免疫層析產(chǎn)品,其靈敏度有所提高,但普通熒光免疫層析采取熒光素作為標(biāo)記物,結(jié)果受雜光的影響無法消除,定量不精準(zhǔn)。最新一代POCT產(chǎn)品應(yīng)運(yùn)而生,時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù),以熒光微球?yàn)闃?biāo)記物,高靈敏度,且無雜光干擾,定量更準(zhǔn)確。

1、標(biāo)記物選擇:熒光素和熒光微球

 

        熒光素是分子量幾百至上千的小分子化合物,通過活性基團(tuán)與抗體(抗原)進(jìn)行交聯(lián),并在最終的使用中產(chǎn)生熒光效應(yīng),用于定量。熒光素種類繁多,激發(fā)光范圍幾乎覆蓋紫外到紅外區(qū)段。但結(jié)果受雜光的影響無法消除,定量不準(zhǔn)確。如下圖:

 

                                             

        熒光微球是以鑭系元素(最常用的是銪Eu)填充至納米級(jí)的聚苯乙烯微球中制作而成。微球與抗體(抗原)交聯(lián)后,可用于抗原(抗體)檢測(cè)。熒光微球比熒光素有更大的Stock位移,例如最常見的Eu,激發(fā)光在365nm,而發(fā)射光在610nm左右,Stocks位移大于200nm,可以有效排除激發(fā)光和非特異性熒光對(duì)信號(hào)采集的干擾,提高檢驗(yàn)的特異性。Eu屬惰性元素,與熒光素相比,不易被光漂白,結(jié)果更穩(wěn)定。

 

      熒光微球具有很長(zhǎng)的熒光衰減時(shí)間(500~2000uS),而熒光素的熒光信號(hào)衰減時(shí)間都非常短(5~100uS),基于這點(diǎn),熒光微球可以開發(fā)出時(shí)間分辨技術(shù)??梢赃m當(dāng)延遲測(cè)量時(shí)間,待背景熒光完全衰減后測(cè)定,可消除激發(fā)光的干擾,提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

 

         基于以上兩點(diǎn),我們說納米微球時(shí)間分辨熒光開啟了POCT標(biāo)志物檢測(cè)技術(shù)的新十年,并不為過。

 

 

時(shí)間分辨熒光與普通熒光的對(duì)比圖

 

 

2、操作簡(jiǎn)化:一步法和兩步法

 

        所謂一步、兩步是指操作步驟。

 

       一步法簡(jiǎn)化了人員操作,只需將樣本加入反應(yīng)板即可,這對(duì)低靈敏度項(xiàng)目(例如MAU)來說,基本滿足了性能要求(主要是精密性和準(zhǔn)確性)也減輕了操作強(qiáng)度。但對(duì)于心臟標(biāo)志物這種高靈敏度且對(duì)急性心血管疾病診斷極有價(jià)值的項(xiàng)目,一步法以操作換性能的方式就顯得尷尬。

 

        兩步法和一步法相比,在加入反應(yīng)板前,先將樣本進(jìn)行稀釋處理,有效排除樣本中雜質(zhì)的干擾,從而提高精密性和準(zhǔn)確性,可以確保檢測(cè)結(jié)果不會(huì)因性能不足誤導(dǎo)患者治療。

 

3、抗原抗體

 

       俄羅斯航空發(fā)動(dòng)機(jī)終身院士法沃爾斯基說過這樣的話:“所有飛行器上的東西,它們都是提高阻力增加重量的,唯獨(dú)發(fā)動(dòng)機(jī)是提高動(dòng)力的。只要發(fā)動(dòng)機(jī)好,綁上一塊木板也能飛起來。”

 

       這個(gè)道理在以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的產(chǎn)品中同樣適用。好的抗原抗體猶如好的發(fā)動(dòng)機(jī),在任何情況下,皆需選用優(yōu)質(zhì)且穩(wěn)定性好的生物原料。抗原抗體的質(zhì)量至少占了產(chǎn)品品質(zhì)的50%的權(quán)重。因此,瑞輝生物產(chǎn)品使用的抗原抗體來源于國(guó)際知名廠家,并通過嚴(yán)格質(zhì)控、匹配,確保產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

 

4、國(guó)產(chǎn)設(shè)備的春天

 

        2017年1月份,四川省政府采購(gòu)網(wǎng)掛出的《四川省財(cái)政廳關(guān)于公布 2017 年度省級(jí)政府采購(gòu)進(jìn)口產(chǎn)品清單的通知》明令要求二甲及以下醫(yī)院(或單位)應(yīng)使用93 種醫(yī)療設(shè)備的國(guó)內(nèi)產(chǎn)品; 國(guó)家層面更是將浙江、上海、江蘇、廣東和四川 5 省市列入扶持國(guó)產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備首批試點(diǎn)推廣范圍。

 

        2017年3月份,中國(guó)醫(yī)學(xué)裝備協(xié)會(huì)公布了第三批優(yōu)秀國(guó)產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備產(chǎn)品目錄,POCT產(chǎn)品第一次進(jìn)入優(yōu)秀國(guó)產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備的目錄。

 

        政府和協(xié)會(huì)不謀而合的節(jié)奏,似乎也在誥召天下,國(guó)產(chǎn)設(shè)備的春天不遠(yuǎn)了,尤其對(duì)時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù)來講是特大的利好。瑞輝生物抓住時(shí)代給予的紅利,不斷提升產(chǎn)品綜合實(shí)力,把POCT時(shí)間分辨免疫層析技術(shù)提升到一個(gè)新的高度,聚焦精準(zhǔn)醫(yī)療,開啟iPOCT智能檢測(cè)新時(shí)代!

 

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